流式細(xì)胞周期

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細(xì)胞周期(Cell Cycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞裆悄。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段矛纹。間期又分為三期：即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)光稼。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時(shí)離開細(xì)胞周期或南，停止細(xì)胞分裂，執(zhí)行一定生物學(xué)功能(G0期)艾君。

流式細(xì)胞儀PI染色法檢測(cè)細(xì)胞周期的原理：由于細(xì)胞周期各時(shí)相的DNA 含量不同,通常正常細(xì)胞的G1/ G0 期具有二倍體細(xì)胞的DNA含量(2N) ,而 G2/ M 期具有四倍體細(xì)胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介于二倍體和四倍體之間采够。PI(碘化丙啶)為插入性核酸熒光染料，能選擇性嵌入核酸DNA和RNA雙螺旋的堿基之間與之結(jié)合冰垄，結(jié)合量與DNA的含量成正比關(guān)系蹬癌，其熒光強(qiáng)度直接能反映細(xì)胞內(nèi)DNA含量。因此,通過流式細(xì)胞儀PI染色法對(duì)細(xì)胞內(nèi)DNA含量進(jìn)行檢測(cè)時(shí),可以將細(xì)胞周期各時(shí)相區(qū)分為G1/G0 期,S 期和G2/M 期,獲得的流式直方圖對(duì)應(yīng)的各細(xì)胞周期可通過特殊軟件計(jì)算各時(shí)相的細(xì)胞百分率播演。

實(shí)驗(yàn)流程：

收集細(xì)胞-PBS洗滌細(xì)胞-固定過夜-PBS洗滌細(xì)胞-去除RNA-熒光標(biāo)記-上機(jī)檢測(cè)

送樣運(yùn)輸要求：

細(xì)胞周期檢測(cè)需要細(xì)胞量比較多冀瓦，6 孔板送樣要求匯合度在70%以上伴奥，但不能超過90%写烤。

細(xì)胞消化后用-20℃預(yù)冷的70%乙醇吹散混勻，4℃固定過夜拾徙，封口膜封好洲炊，4℃運(yùn)輸寄到實(shí)驗(yàn)室。

僅供科研用途尼啡，不可用于臨床診斷暂衡！