斑馬魚攝食行為實驗

【服務(wù)簡介】

進食行為是一種復(fù)雜的行為鹅士，與食物攝入密切相關(guān)券躁。魚類具有多種多樣的攝食習(xí)性和攝食模式，是研究攝食行為調(diào)控的良好實驗?zāi)Ｐ偷糁选ｔ~類的水生性質(zhì)經(jīng)常給攝食行為的研究帶來挑戰(zhàn)也拜，研究人員使用了不同的方法，包括實地研究趾痘、自由生活動物的觀察和實驗室實驗慢哈。攝食行為受許多環(huán)境因素以及涉及中樞和外周激素因素以及代謝物的復(fù)雜穩(wěn)態(tài)機制的調(diào)節(jié)。斑馬魚作為模式生物永票，已經(jīng)成為代謝領(lǐng)域相關(guān)研究不可或缺的模型之一卵贱。魚類在攝食過程中受到多種因素的調(diào)節(jié)。例如侣集，環(huán)境影響（水體 pH 紊亂键俱、水體遭受污染等）、群體因素（養(yǎng)殖密度過大發(fā)生爭斗等）或人類活動（養(yǎng)殖過程中的人工操作）等都會對魚類的攝食產(chǎn)生抑制作用世分。

成魚攝食實驗

將長期處于同一飼養(yǎng)條件下的AB系斑馬魚稱重编振，挑選體重接近的斑馬魚，單獨飼養(yǎng)環(huán)境中臭埋，禁食18 h踪央，保證所有斑馬魚都處于饑餓狀態(tài)；在小圓型魚缸中加入500 mL干凈水循環(huán)中的水瓢阴，共六個小圓缸畅蹂，分為兩組，每組三個平行荣恐。然后斑馬魚腹腔注射性腺升糖素或 rGFP 4 μL魁莉，每個平行5條魚。將新鮮孵化出的相同數(shù)量豐年蝦加入小圓缸中募胃。以空白水體中豐年蝦數(shù)量為起始旗唁，測量豐年蝦數(shù)量方法為：充分攪動水體，使得水體中蝦分布均勻痹束，然后分散挑選五個點检疫，每個點用移液器吸取1 mL水，五個點共5 mL祷嘶，在體式顯微鏡下得出豐年蝦的數(shù)量屎媳，然后通過計算得出水體中總豐年蝦的數(shù)量作為總量圖夺溢。計算30 min、1 h烛谊、2 h风响、3 h、4 h和5 h后剩余豐年蝦的數(shù)量丹禀，以總量減去剩余豐年蝦的數(shù)量状勤，可以得出在固定的時間內(nèi)斑馬魚攝食總量。

 圖1 斑馬魚成魚攝食示意圖

幼魚攝食實驗

幼魚食物熒光染色：將幼魚魚食100 mg双泪、黃綠色熒光聚苯乙烯微球(Eugene, OR)150 μL與50 μL蒸餾水充分混合持搜，均勻涂抹至載玻片表面，避光風(fēng)干焙矛，用小刀刮下葫盼，研磨成細粉后備用。將7 dpf的幼魚置于干凈的培養(yǎng)皿中村斟，加入定量蒸餾水贫导，保證實驗組和對照組幼魚密度一致，蒸餾水體積一致蟆盹。然后加入等量的染色 PA脱盲，然后在不同的時間點后，將魚換到干凈的水體中日缨，然后迅速低溫麻醉钱反，保證幼魚不再活動。將麻醉好的魚放置在載玻片上匣距，用吸水紙吸干表面水分面哥，然后利用熒光顯微鏡拍照，通過圖像計算得出熒光面積毅待，以此來比較實驗組與對照組攝食差異尚卫。    早期大腦發(fā)育會受到許多遺傳和環(huán)境因素的影響，對大腦功能和行為產(chǎn)生長期影響尸红。斑馬魚幼蟲行為的高通量分析有助于識別這些因素吱涉，這些分析可以在多孔或多泳道板中成像。但斑馬魚幼蟲在行為實驗中的營養(yǎng)需求尚不完全清楚外里。斑馬魚幼蟲在受精后4到5天（dpf）之間開始進食怎爵，但可以僅靠蛋黃中提取的營養(yǎng)物質(zhì)生活，直到至少7 dpf盅蝗。為了檢查喂食是否會影響行為鳖链，測量5、6和 7 dpf下喂食和不喂食的廣泛行為墩莫。攝食對5日齡幼蟲的行為沒有顯著影響芙委。相比之下逞敷，與未喂食的幼蟲相比，喂食的6日齡和7日齡幼蟲對視覺刺激的回避反應(yīng)增加灌侣，游泳速度增加推捐，休息減少。此外侧啼，喂食的7日齡幼蟲在5至7 dpf之間可以連續(xù)獲取食物牛柒。影響斑馬魚攝食行為的因素有很多，像斑馬魚品系在標(biāo)準實驗室條件下開始從水面覓食的潛伏期存在顯著差異慨菱。當(dāng)營養(yǎng)受到限制時焰络，魚會更快地進食戴甩，厭惡刺激導(dǎo)致魚延遲進食等符喝。

 圖2 7日齡斑馬魚幼蟲的魚與魚之間的距離受攝食的影響

文獻引用

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