斑馬魚(yú)求偶行為實(shí)驗(yàn)

【服務(wù)簡(jiǎn)介】

斑馬魚(yú)雄魚(yú)的求偶行為主要包括“追尾”骑脱、“推擠”、“碰撞”苍糠、“舞蹈展示(轉(zhuǎn)圈以及“8”字型運(yùn)動(dòng))”叁丧、“震顫(排精)”等。以15min內(nèi)的求偶總時(shí)間岳瞭、求偶次數(shù)拥娄、平均每次求偶時(shí)間、長(zhǎng)于5s的求偶次數(shù)瞳筏、長(zhǎng)于5s的求偶時(shí)間稚瘾、短于5s的求偶次數(shù)等為指標(biāo)來(lái)定量求偶行為。

繁殖行為測(cè)試在1L的燒杯中進(jìn)行姚炕，在接近燒杯底部 25px處鋪有一層銅網(wǎng)以防產(chǎn)下的卵被斑馬魚(yú)吃掉摊欠。燒杯使用前用相應(yīng)濃度的暴露液浸泡，保持一致水溫（25±1）℃柱宦。隨機(jī)選取每一個(gè)濃度梯度下的斑馬魚(yú)雌雄各8尾分別按雌雄比 1∶1配對(duì)放入 8個(gè)燒杯中過(guò)夜（每個(gè)燒杯中含有斑馬魚(yú)雌魚(yú)些椒、雄魚(yú)各1尾）。由于斑馬魚(yú)是光周期產(chǎn)卵掸刊，求偶行為及產(chǎn)卵主要發(fā)生在光照開(kāi)啟后的30min內(nèi)免糕。實(shí)驗(yàn)于次日光照開(kāi)啟 1min后開(kāi)始用攝像機(jī)拍攝記錄斑馬魚(yú)的求偶行為，連續(xù)拍攝15min錄像資料隨后在電腦上進(jìn)行分析忧侧，通過(guò)秒表軟件分析記錄各行為指標(biāo)的時(shí)間及頻次石窑。    用聚丙烯矩形水箱（尺寸為 23 * 15 * 15（cm））設(shè)計(jì)一種求偶行為裝置，用兩個(gè)透明隔板將該裝置分割成三個(gè)的隔間苍柏，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的三條斑馬魚(yú)間相互可視尼斧。為了避免周圍環(huán)境的干擾，在整個(gè)裝置外側(cè)裝有黑色帷幕试吁。求偶裝置放置在裝有 LED 燈板的上方（光源強(qiáng)度為 500 lux）棺棵，并配有丙烯酸散射板楼咳；視頻拍攝選用紅外光源，波長(zhǎng)為800 nm烛恤。水缸的垂直上方裝有高分辨率攝像頭母怜，誘發(fā)求偶行為的光源強(qiáng)度為 500 lux。使用攝像機(jī)記錄了連續(xù)求偶行為缚柏。在求偶測(cè)試中苹熏，斑馬魚(yú)的求偶行為包括兩個(gè)行為步驟。斑馬魚(yú)第一次游動(dòng)接近異性币喧，被定義為接近區(qū)域（ROA）轨域，記錄相關(guān)時(shí)間和距離；然后斑馬魚(yú)快速游動(dòng)接觸異性（接觸區(qū)域（ROC））杀餐，被定義為求偶指數(shù)（CI）干发。相應(yīng)地，斑馬魚(yú)接近最喜歡的異性周圍的地區(qū)顯示其求偶偏好史翘。求偶行為發(fā)生4h后移出親魚(yú)枉长，收集受精卵并統(tǒng)計(jì)產(chǎn)卵量與受精率用以評(píng)估繁殖率。

 圖 求偶過(guò)程中的斑馬魚(yú)求偶行為指數(shù)示例

指標(biāo)分析

以斑馬魚(yú)雄魚(yú)“追逐”琼讽、“推擠”必峰、“碰撞”、“排精”等行為的發(fā)生頻次為指標(biāo)定量斑馬魚(yú)求偶行為钻蹬。為減少人為誤差, 錄像資料由專人負(fù)責(zé)記錄分析吼蚁。

各行為學(xué)參數(shù)定義及統(tǒng)計(jì)指數(shù)如下：

• 追逐(Chasing): 雄魚(yú)追逐雌魚(yú), 方向上一致,雄魚(yú)與雌魚(yú)身體基本在一條線上, 偶爾會(huì)有身體上的碰撞;

• 推擠(Pushing): 雄魚(yú)推撞雌魚(yú)腹部或身體其他部位, 迫使雌魚(yú)前行, 方向上不一致, 雄魚(yú)與雌魚(yú)身體有一定的角度;

• 碰撞(Tail-Nose): 雄魚(yú)用頭或嘴有意碰撞雌魚(yú);

• 排精(Quiver): 雄魚(yú)與雌魚(yú)身體高頻震顫, 此時(shí)雄魚(yú)與雌魚(yú)身體平行, 頭部并列。雌魚(yú)身體通常有半月形的彎曲;

• 繁殖努力(Reproductive effort): 用各個(gè)求偶行為參數(shù)的發(fā)生頻率除以產(chǎn)卵量來(lái)表示问欠。

（1）吸引指數(shù) Attracting Index（AI）：每條斑馬魚(yú)求偶行為的平均速度桂敛；

（2）選擇指數(shù) Selecting Index（SI）：每條斑馬魚(yú)在求偶行為中的垂直速度。

（3）接近區(qū)域（ROA）：與隔板相鄰的一部分區(qū)域溅潜，也就是每隔間靠近隔板的區(qū)域术唬。斑馬魚(yú)的頭部進(jìn)入該區(qū)域時(shí)，將其視為在該區(qū)域內(nèi)滚澜。

（4）ROA 時(shí)間（Time in ROA）：斑馬魚(yú)停留在接近區(qū)域的總時(shí)間粗仓。

（5）求偶指數(shù) Courtship index（CI）：斑馬魚(yú)追逐另一條斑馬魚(yú)所花費(fèi)的時(shí)間。

參考文獻(xiàn)

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