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斑馬魚慢性不可預(yù)測(cè)應(yīng)激(CUS)行為實(shí)驗(yàn)
【服務(wù)簡(jiǎn)介】
目前慢性不可預(yù)測(cè)應(yīng)激(CUS)是嚙齒動(dòng)物最常用的抑郁實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭卉狡叮梢阅7略诮箲]、抑郁以及相關(guān)情緒障礙患者中觀察到的許多行為特征傍药。對(duì)慢性壓力的最初反應(yīng)是焦慮磺平,之后是抑郁,并且這些精神障礙是其他身體疾补樟伞(如炎癥性腸布鹋病)不可否認(rèn)的危險(xiǎn)因素。因此必須開發(fā)更簡(jiǎn)單的模型來(lái)研究慢性壓力對(duì)大腦的影響俱诸,并確定其可有效用于 CNS 藥物的篩選菠劝。慢性不可預(yù)測(cè)應(yīng)激(CUS)是一種廣泛使用的抑郁實(shí)驗(yàn)?zāi)P停渲袊X動(dòng)物受到一系列慢性壓力源的影響乙埃,例如約束闸英、擁擠、隔離介袜、溫度變化甫何、光線、噪音和/或捕食者暴露等遇伞。作為嚙齒動(dòng)物研究的補(bǔ)充辙喂,斑馬魚正在成為評(píng)估情感障礙(焦慮和抑郁等)病理生物學(xué)機(jī)制的強(qiáng)大模式生物。
實(shí)驗(yàn)中采用禁食、驅(qū)逐應(yīng)激巍耗、密集擁擠秋麸、社交隔離等應(yīng)激源建立抑郁斑馬魚模型,后續(xù)可通過(guò)行為學(xué)測(cè)定以及單胺神經(jīng)遞質(zhì)含量分析炬太,對(duì)模型的可行性和有效性進(jìn)行評(píng)價(jià)灸蟆。同時(shí)在經(jīng)過(guò)一系列 CUS 后,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物會(huì)表現(xiàn)出神經(jīng)內(nèi)分泌功能的改變亲族。
應(yīng)激試驗(yàn)過(guò)程
1. 禁食24h
2. 黑暗環(huán)境處理24h
3. 紅桶擁擠應(yīng)激8h炒考,轉(zhuǎn)移回水箱
4. 暴露于攻擊性魚(2條成年藍(lán)曼龍)24h
5. 明暗應(yīng)激處理12h→30%淺水應(yīng)激12h
6. 社交隔離8h→禁食24h
7. 0.5L三色杯擁擠應(yīng)激6h
8. 紅桶應(yīng)激,同時(shí)強(qiáng)光照射霎迫,加入10L攻擊性魚的養(yǎng)殖水
9. 20%淺水應(yīng)激加黑暗處理24h
10. 紅桶應(yīng)激斋枢,加入30mL從斑馬魚體表刮取的警示信息素暴露8 h
11. 置于1.5L新型水箱中進(jìn)行密集擁擠環(huán)境應(yīng)激6h→加入10%攻擊魚養(yǎng)殖水
12. 明暗應(yīng)激處理8h→60%淺水應(yīng)激+強(qiáng)光照射2h
13. 魚網(wǎng)追逐20min,黑暗處理24h
14. 暴露于攻擊性魚24h
15. 更換60%水→三色杯應(yīng)激8h→添加10%同類魚養(yǎng)殖水
16. 添加40mL警示信息素知给,在22℃水中于強(qiáng)光燈照射下瓤帚,搖床(60rpm)震蕩6h
17. 社交隔離8h→黑暗處理16h
18. 30%淺水暴露8h,添加捕食者養(yǎng)殖水10L
19. 明暗箱應(yīng)激5min→暴露于空氣中1min涩赢,重復(fù)3次→兩條藍(lán)曼龍?zhí)幚?4h
20. 黑暗與禁食24h
21. 三色杯且強(qiáng)光照射6h→50%淺水暴露6h
22. 社交隔離8h→魚網(wǎng)驅(qū)逐15min→添加10%捕食者養(yǎng)殖水
23. 空氣暴露→1條藍(lán)曼龍應(yīng)激5h→加入警示信息素
24. 更換50%水戈次,禁食24h
25. 黑暗處理24h
26. 30%淺水和強(qiáng)光照射2h→紅桶應(yīng)激6h
27. 暴露于2條成年藍(lán)曼龍24h
28. 強(qiáng)光照射加擁擠應(yīng)激→警示信息素暴露6h
29. 禁食24h
30. 魚網(wǎng)追逐15min→5L小水箱擁擠且強(qiáng)光應(yīng)激20min→冰塊局部低溫應(yīng)激→30%淺水應(yīng)激24h
31. 三色杯應(yīng)激8h→添加10%捕食者養(yǎng)殖水
32. 明暗箱(15條/L)應(yīng)激8h→60%淺水暴露16L
33. 紅桶應(yīng)激8h
34. 黑暗且禁食處理24h
35. 擁擠(30條/L)加強(qiáng)光應(yīng)激8h→暴露于紅色斑馬魚14h
實(shí)驗(yàn)流程簡(jiǎn)圖
參考文獻(xiàn)
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