qRT-PCR實驗

【服務(wù)簡介】

熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，由于該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍恕沫，而且與常規(guī)PCR相比监憎，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題婶溯、自動化程度高等特點鲸阔，目前已得到廣泛應(yīng)用。 熒光定量PCR技術(shù)是通過熒光染料或熒光標記的特異性探針爬虱，對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤隶债，實時監(jiān)控反應(yīng)過程。隨著PCR 反應(yīng)的進行跑筝，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積死讹，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)曲梗，收集一次熒光強度信號赞警，這樣就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化妓忍，結(jié)合相應(yīng)的軟件對產(chǎn)物進行分析，可以得到熒光擴增曲線愧旦，計算待測樣品初始模版的量世剖。實時熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍，運用該項技術(shù)笤虫，可以對DNA旁瘫、RNA樣品進行相對定量、絕對定量和定性分析琼蚯。

【實驗案例】

RTPCR案例酬凳，圖示為處理后目的基因轉(zhuǎn)錄水平mRNA表達量的改變

【應(yīng)用場景】

1. 臨床上病原微生物檢測、支原體檢測遭庶、病毒核酸檢測

2. 分子生物學(xué)中宁仔，檢測目的基因RNA水平的表達情況，通過藥物處理或者其他處理基因的表達改變研究基因的調(diào)控方式和功能峦睡。