細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)

【服務(wù)簡(jiǎn)介】

細(xì)胞凋亡通常稱為細(xì)胞程序性死亡干像，是由基因控制的主動(dòng)性細(xì)胞死亡過(guò)程。越來(lái)越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)驰弄，細(xì)胞凋亡與多種疾病密切相關(guān)麻汰，如癌細(xì)胞具有連續(xù)增殖、抵抗細(xì)胞凋亡能力戚篙，利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡可為腫瘤診斷五鲫，療效評(píng)價(jià)和預(yù)后預(yù)測(cè)提供了重要的參考指標(biāo)。

Annexin V和PI雙染法是流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡的經(jīng)典方法岔擂，它是基于凋亡的早期細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine, PS）從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面這一原理來(lái)實(shí)現(xiàn)的位喂。Annexin Ⅴ（膜聯(lián)蛋白 V）是一種分子量為35-36 kDa的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力結(jié)合乱灵，將Annexin V 進(jìn)行熒光素FITC標(biāo)記塑崖，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。碘化丙啶（Propidium, PI）是一種可與DNA結(jié)合的染料痛倚，它不能透過(guò)正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜规婆，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，PI 能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染蝉稳。將Annexin V與PI聯(lián)合使用時(shí)抒蚜，便可用來(lái)鑒別活細(xì)胞，凋亡細(xì)胞及死亡細(xì)胞颠区。

【實(shí)驗(yàn)案例】

Annexin V和PI雙染法實(shí)驗(yàn)案例削锰，圖中綠色熒光代表正常和凋亡早期的細(xì)胞通铲。紅色為調(diào)往中后期的細(xì)胞

【應(yīng)用場(chǎng)景】

1. 藥物處理腫瘤細(xì)胞毕莱，收集細(xì)胞，進(jìn)行染色颅夺，通過(guò)流式細(xì)胞儀或者免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞的凋亡情況朋截，以此來(lái)判斷腫瘤細(xì)胞對(duì)該藥物的耐受能力。