流式細(xì)胞周期

【服務(wù)簡介】

細(xì)胞周期(Cell Cycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程诱桂，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段呈昔。間期又分為三期：即DNA合成前期(G1期)挥等、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時(shí)離開細(xì)胞周期堤尾，停止細(xì)胞分裂肝劲，執(zhí)行一定生物學(xué)功能(G0期)。

流式細(xì)胞儀PI染色法檢測細(xì)胞周期的原理：由于細(xì)胞周期各時(shí)相的DNA 含量不同,通常正常細(xì)胞的G1/ G0 期具有二倍體細(xì)胞的DNA含量(2N) ,而 G2/ M 期具有四倍體細(xì)胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介于二倍體和四倍體之間郭宝。PI(碘化丙啶)為插入性核酸熒光染料涡相，能選擇性嵌入核酸DNA和RNA雙螺旋的堿基之間與之結(jié)合，結(jié)合量與DNA的含量成正比關(guān)系剩蟀，其熒光強(qiáng)度直接能反映細(xì)胞內(nèi)DNA含量催蝗。因此,通過流式細(xì)胞儀PI染色法對(duì)細(xì)胞內(nèi)DNA含量進(jìn)行檢測時(shí),可以將細(xì)胞周期各時(shí)相區(qū)分為G1/G0 期,S 期和G2/M 期,獲得的流式直方圖對(duì)應(yīng)的各細(xì)胞周期可通過特殊軟件計(jì)算各時(shí)相的細(xì)胞百分率。

實(shí)驗(yàn)流程：

收集細(xì)胞-PBS洗滌細(xì)胞-固定過夜-PBS洗滌細(xì)胞-去除RNA-熒光標(biāo)記-上機(jī)檢測

送樣運(yùn)輸要求：

細(xì)胞周期檢測需要細(xì)胞量比較多育特，6 孔板送樣要求匯合度在70%以上丙号，但不能超過90%。

細(xì)胞消化后用-20℃預(yù)冷的70%乙醇吹散混勻缰冤，4℃固定過夜犬缨，封口膜封好，4℃運(yùn)輸寄到實(shí)驗(yàn)室棉浸。

僅供科研用途怀薛，不可用于臨床診斷！