斑馬魚求偶行為實驗

【服務(wù)簡介】

斑馬魚雄魚的求偶行為主要包括“追尾”垄分、“推擠”、“碰撞”娃磺、“舞蹈展示(轉(zhuǎn)圈以及“8”字型運動)”薄湿、“震顫(排精)”等。以15min內(nèi)的求偶總時間偷卧、求偶次數(shù)豺瘤、平均每次求偶時間、長于5s的求偶次數(shù)涯冠、長于5s的求偶時間炉奴、短于5s的求偶次數(shù)等為指標(biāo)來定量求偶行為。

繁殖行為測試在1L的燒杯中進行蛇更，在接近燒杯底部 25px處鋪有一層銅網(wǎng)以防產(chǎn)下的卵被斑馬魚吃掉瞻赶。燒杯使用前用相應(yīng)濃度的暴露液浸泡赛糟，保持一致水溫（25±1）℃。隨機選取每一個濃度梯度下的斑馬魚雌雄各8尾分別按雌雄比 1∶1配對放入 8個燒杯中過夜（每個燒杯中含有斑馬魚雌魚砸逊、雄魚各1尾）璧南。由于斑馬魚是光周期產(chǎn)卵，求偶行為及產(chǎn)卵主要發(fā)生在光照開啟后的30min內(nèi)师逸。實驗于次日光照開啟 1min后開始用攝像機拍攝記錄斑馬魚的求偶行為司倚，連續(xù)拍攝15min錄像資料隨后在電腦上進行分析，通過秒表軟件分析記錄各行為指標(biāo)的時間及頻次篓像。    用聚丙烯矩形水箱（尺寸為 23 * 15 * 15（cm））設(shè)計一種求偶行為裝置动知，用兩個透明隔板將該裝置分割成三個的隔間，進行實驗的三條斑馬魚間相互可視员辩。為了避免周圍環(huán)境的干擾盒粮，在整個裝置外側(cè)裝有黑色帷幕。求偶裝置放置在裝有 LED 燈板的上方（光源強度為 500 lux）奠滑，并配有丙烯酸散射板丹皱；視頻拍攝選用紅外光源，波長為800 nm宋税。水缸的垂直上方裝有高分辨率攝像頭摊崭，誘發(fā)求偶行為的光源強度為 500 lux。使用攝像機記錄了連續(xù)求偶行為杰赛。在求偶測試中呢簸，斑馬魚的求偶行為包括兩個行為步驟。斑馬魚第一次游動接近異性淆攻，被定義為接近區(qū)域（ROA）阔墩，記錄相關(guān)時間和距離；然后斑馬魚快速游動接觸異性（接觸區(qū)域（ROC））瓶珊，被定義為求偶指數(shù)（CI）啸箫。相應(yīng)地，斑馬魚接近最喜歡的異性周圍的地區(qū)顯示其求偶偏好伞芹。求偶行為發(fā)生4h后移出親魚忘苛，收集受精卵并統(tǒng)計產(chǎn)卵量與受精率用以評估繁殖率。

 圖 求偶過程中的斑馬魚求偶行為指數(shù)示例

指標(biāo)分析

以斑馬魚雄魚“追逐”唱较、“推擠”扎唾、“碰撞”、“排精”等行為的發(fā)生頻次為指標(biāo)定量斑馬魚求偶行為南缓。為減少人為誤差, 錄像資料由專人負責(zé)記錄分析胸遇。

各行為學(xué)參數(shù)定義及統(tǒng)計指數(shù)如下：

• 追逐(Chasing): 雄魚追逐雌魚, 方向上一致,雄魚與雌魚身體基本在一條線上, 偶爾會有身體上的碰撞;

• 推擠(Pushing): 雄魚推撞雌魚腹部或身體其他部位, 迫使雌魚前行, 方向上不一致, 雄魚與雌魚身體有一定的角度;

• 碰撞(Tail-Nose): 雄魚用頭或嘴有意碰撞雌魚;

• 排精(Quiver): 雄魚與雌魚身體高頻震顫, 此時雄魚與雌魚身體平行, 頭部并列。雌魚身體通常有半月形的彎曲;

• 繁殖努力(Reproductive effort): 用各個求偶行為參數(shù)的發(fā)生頻率除以產(chǎn)卵量來表示汉形。

（1）吸引指數(shù) Attracting Index（AI）：每條斑馬魚求偶行為的平均速度纸镊；

（2）選擇指數(shù) Selecting Index（SI）：每條斑馬魚在求偶行為中的垂直速度倍阐。

（3）接近區(qū)域（ROA）：與隔板相鄰的一部分區(qū)域，也就是每隔間靠近隔板的區(qū)域逗威。斑馬魚的頭部進入該區(qū)域時峰搪，將其視為在該區(qū)域內(nèi)。

（4）ROA 時間（Time in ROA）：斑馬魚停留在接近區(qū)域的總時間凯旭。

（5）求偶指數(shù) Courtship index（CI）：斑馬魚追逐另一條斑馬魚所花費的時間概耻。

參考文獻

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