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斑馬魚慢性不可預(yù)測應(yīng)激(CUS)行為實驗

斑馬魚慢性不可預(yù)測應(yīng)激(CUS)行為實驗

目前慢性不可預(yù)測應(yīng)激(CUS)是嚙齒動物最常用的抑郁實驗?zāi)P椭唬梢阅7略诮箲]函匕、抑郁以及相關(guān)情緒障礙患者中觀察到的許多行為特征。


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目前慢性不可預(yù)測應(yīng)激(CUS)是嚙齒動物最常用的抑郁實驗?zāi)P椭蝗洌梢阅7略诮箲]浦箱、抑郁以及相關(guān)情緒障礙患者中觀察到的許多行為特征吸耿。



斑馬魚慢性不可預(yù)測應(yīng)激(CUS)行為實驗



【服務(wù)簡介】


目前慢性不可預(yù)測應(yīng)激(CUS)是嚙齒動物最常用的抑郁實驗?zāi)P椭混袈啵梢阅7略诮箲]、抑郁以及相關(guān)情緒障礙患者中觀察到的許多行為特征咽安。對慢性壓力的最初反應(yīng)是焦慮伴网,之后是抑郁,并且這些精神障礙是其他身體疾沧卑簟(如炎癥性腸苍杼凇)不可否認(rèn)的危險因素。因此必須開發(fā)更簡單的模型來研究慢性壓力對大腦的影響糕珊,并確定其可有效用于 CNS 藥物的篩選动分。慢性不可預(yù)測應(yīng)激(CUS)是一種廣泛使用的抑郁實驗?zāi)P停渲袊X動物受到一系列慢性壓力源的影響红选,例如約束澜公、擁擠、隔離喇肋、溫度變化坟乾、光線迹辐、噪音和/或捕食者暴露等。作為嚙齒動物研究的補(bǔ)充甚侣,斑馬魚正在成為評估情感障礙(焦慮和抑郁等)病理生物學(xué)機(jī)制的強(qiáng)大模式生物明吩。


實驗中采用禁食、驅(qū)逐應(yīng)激殷费、密集擁擠印荔、社交隔離等應(yīng)激源建立抑郁斑馬魚模型,后續(xù)可通過行為學(xué)測定以及單胺神經(jīng)遞質(zhì)含量分析详羡,對模型的可行性和有效性進(jìn)行評價躏鱼。同時在經(jīng)過一系列 CUS 后,實驗動物會表現(xiàn)出神經(jīng)內(nèi)分泌功能的改變殷绍。


應(yīng)激試驗過程


1. 禁食24h

2. 黑暗環(huán)境處理24h

3. 紅桶擁擠應(yīng)激8h染苛,轉(zhuǎn)移回水箱

4. 暴露于攻擊性魚(2條成年藍(lán)曼龍)24h

5. 明暗應(yīng)激處理12h→30%淺水應(yīng)激12h

6. 社交隔離8h→禁食24h

7. 0.5L三色杯擁擠應(yīng)激6h

8. 紅桶應(yīng)激,同時強(qiáng)光照射主到,加入10L攻擊性魚的養(yǎng)殖水

9. 20%淺水應(yīng)激加黑暗處理24h

10. 紅桶應(yīng)激茶行,加入30mL從斑馬魚體表刮取的警示信息素暴露8 h

11. 置于1.5L新型水箱中進(jìn)行密集擁擠環(huán)境應(yīng)激6h→加入10%攻擊魚養(yǎng)殖水

12. 明暗應(yīng)激處理8h→60%淺水應(yīng)激+強(qiáng)光照射2h

13. 魚網(wǎng)追逐20min,黑暗處理24h

14. 暴露于攻擊性魚24h

15. 更換60%水→三色杯應(yīng)激8h→添加10%同類魚養(yǎng)殖水

16. 添加40mL警示信息素登钥,在22℃水中于強(qiáng)光燈照射下畔师,搖床(60rpm)震蕩6h

17. 社交隔離8h→黑暗處理16h

18. 30%淺水暴露8h,添加捕食者養(yǎng)殖水10L

19. 明暗箱應(yīng)激5min→暴露于空氣中1min牧牢,重復(fù)3次→兩條藍(lán)曼龍?zhí)幚?4h

20. 黑暗與禁食24h

21. 三色杯且強(qiáng)光照射6h→50%淺水暴露6h

22. 社交隔離8h→魚網(wǎng)驅(qū)逐15min→添加10%捕食者養(yǎng)殖水

23. 空氣暴露→1條藍(lán)曼龍應(yīng)激5h→加入警示信息素

24. 更換50%水看锉,禁食24h

25. 黑暗處理24h

26. 30%淺水和強(qiáng)光照射2h→紅桶應(yīng)激6h

27. 暴露于2條成年藍(lán)曼龍24h

28. 強(qiáng)光照射加擁擠應(yīng)激→警示信息素暴露6h

29. 禁食24h

30. 魚網(wǎng)追逐15min→5L小水箱擁擠且強(qiáng)光應(yīng)激20min→冰塊局部低溫應(yīng)激→30%淺水應(yīng)激24h

31. 三色杯應(yīng)激8h→添加10%捕食者養(yǎng)殖水

32. 明暗箱(15條/L)應(yīng)激8h→60%淺水暴露16L

33. 紅桶應(yīng)激8h

34. 黑暗且禁食處理24h

35. 擁擠(30條/L)加強(qiáng)光應(yīng)激8h→暴露于紅色斑馬魚14h


 實驗流程簡圖


參考文獻(xiàn)

Fonseka T M, Wen X Y, Foster J A, et al. Zebrafish models of major depressive disorders [J]. J Neurosci Res, 2016, 94(1): 3-14.

胡國俊. 丙戊酸鈉對慢性不可預(yù)知應(yīng)激誘導(dǎo)斑馬魚抑郁模型的改善作用及機(jī)制研究[D].西南大學(xué),2023.DOI:10.27684/d.cnki.gxndx.2022.002756.

Owens M J, Nemeroff C B. Role of serotonin in the pathophysiology of depression: focus on the serotonin transporter [J]. Clin Chem, 1994, 40(2): 288-295.


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