qRT-PCR實(shí)驗(yàn)

【服務(wù)簡(jiǎn)介】

熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出壶愤，由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍淑倾，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)征椒、有效解決PCR污染問(wèn)題娇哆、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前已得到廣泛應(yīng)用勃救。 熒光定量PCR技術(shù)是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針碍讨，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程蒙秒。隨著PCR 反應(yīng)的進(jìn)行勃黍，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加晕讲。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)覆获，收集一次熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化瓢省，結(jié)合相應(yīng)的軟件對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析弄息，可以得到熒光擴(kuò)增曲線，計(jì)算待測(cè)樣品初始模版的量勤婚。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍摹量，運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù)，可以對(duì)DNA蛔六、RNA樣品進(jìn)行相對(duì)定量、絕對(duì)定量和定性分析废亭。

【實(shí)驗(yàn)案例】

RTPCR案例国章，圖示為處理后目的基因轉(zhuǎn)錄水平mRNA表達(dá)量的改變

【應(yīng)用場(chǎng)景】

1. 臨床上病原微生物檢測(cè)、支原體檢測(cè)豆村、病毒核酸檢測(cè)

2. 分子生物學(xué)中液兽，檢測(cè)目的基因RNA水平的表達(dá)情況，通過(guò)藥物處理或者其他處理基因的表達(dá)改變研究基因的調(diào)控方式和功能掌动。