細胞凋亡實驗

【服務(wù)簡介】

細胞凋亡通常稱為細胞程序性死亡，是由基因控制的主動性細胞死亡過程坚洽。越來越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)戈稿，細胞凋亡與多種疾病密切相關(guān)，如癌細胞具有連續(xù)增殖讶舰、抵抗細胞凋亡能力鞍盗，利用流式細胞儀分析細胞凋亡可為腫瘤診斷，療效評價和預(yù)后預(yù)測提供了重要的參考指標跳昼。

Annexin V和PI雙染法是流式檢測細胞凋亡的經(jīng)典方法般甲，它是基于凋亡的早期細胞膜上的磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine, PS）從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面這一原理來實現(xiàn)的。Annexin Ⅴ（膜聯(lián)蛋白 V）是一種分子量為35-36 kDa的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白鹅颊，能與PS高親和力結(jié)合敷存，將Annexin V 進行熒光素FITC標記，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生堪伍。碘化丙啶（Propidium, PI）是一種可與DNA結(jié)合的染料锚烦，它不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜觅闽，但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI 能夠透過細胞膜而使細胞核紅染挽牢。將Annexin V與PI聯(lián)合使用時谱煤，便可用來鑒別活細胞，凋亡細胞及死亡細胞禽拔。

【實驗案例】

Annexin V和PI雙染法實驗案例刘离，圖中綠色熒光代表正常和凋亡早期的細胞。紅色為調(diào)往中后期的細胞

【應(yīng)用場景】

1. 藥物處理腫瘤細胞睹栖，收集細胞硫惕，進行染色，通過流式細胞儀或者免疫熒光檢測細胞的凋亡情況野来，以此來判斷腫瘤細胞對該藥物的耐受能力恼除。